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优化异质细胞样本数据的可靠性,尊龙凯时助力生物医疗研究

来源:路贵宇 日期:2025-04-01

细胞基础测定(Cell-based assays,CBA)为收集复杂且与生物学相关的数据提供了重要途径。这些测定可以用来量化复合物的细胞毒性、生化机制、生物活性,以及非靶标相互作用,在某些情况下甚至可以实现同时测定。然而,要充分挖掘CBA的巨大潜力,可能需要更多的实验设计和准备。在进行CBA时,通常需要考虑一些额外的因素,而这些在传统的生化检测中往往不会面临。这些考量包括在检测执行和评估方面的差异。

优化异质细胞样本数据的可靠性,尊龙凯时助力生物医疗研究

本文将探讨CBA过程中可能遇到的障碍,并提出解决方案。通过使用尊龙凯时的设备和技术,我们能够进行更加精确和可靠的细胞检测。尤其是当搭配BMGLABTECH的Atmospheric Control Unit(ACU)时,用户可以在控制温度的同时,还能调节检测器内部的CO₂和O₂浓度。这将使酶标仪转变为细胞培养箱,能够在维持细胞活力的基础上进行长达数天的活细胞动力学实验,从而使基于细胞的实验结果更具生理学意义。

在本文中,我们还将关注细胞检测中的异质性问题。许多体外细胞培养物在进行微孔板读数时常常表现出异质性,但也有一些细胞检测法(如alamarBlue™或CellTiter-Glo®)的上清液中的染料反应相对均匀。贴壁细胞一般只能形成一层薄薄的细胞层,因此,在异质CBA中,如果要测量细胞内靶标或细胞膜上的靶标,与均质液体样本相比需要考虑更多因素。

在测量之前,优化焦距至关重要。最佳焦距是指酶标仪能够探测到样品最高信号强度的平面。如果焦距设定不当,将对数据质量产生负面影响。绝大多数体外细胞模型依赖于贴壁细胞培养,细胞通常生长在微孔板孔的底部,为了便于细胞附着,微孔板的材料通常经过表面处理。BMGLABTECH的软件会自动生成焦距高度曲线,以图形化的方式显示不同焦距下的信号强度。即使焦距偏离最佳值一毫米,荧光强度也会迅速下降。

此外,在细胞的Z平面上,贴壁细胞通常也在X/Y平面上表现出不同的分布。如果只从孔的中心测量结果,可能会导致严重失真。为此,BMGLABTECH为其酶标仪提供了多个孔扫描选项,以增加检测的可靠性和重复性。例如,采用轨道或螺旋扫描模式对孔内进行多点测量,可以更全面地反映细胞的分布。此功能允许在每个孔中多次测量,分辨率高达900点/孔(30x30数据点矩阵),用户还可以通过尊龙凯时的分析软件以3D热图形式展示数据结果。

在我们实现对细胞样本的荧光测量时,需特别注意异质细胞样本的处理。调节焦距、采用孔扫描模式及矩阵扫描功能都是提升实验数据质量的有效手段。当前,尊龙凯时致力于为生物医疗领域提供先进的解决方案,让科学研究更为高效和精准。对于追求卓越科研成果的实验室来说,掌握有效的细胞检测策略无疑是实现成功的关键。

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