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NEWS病理染色实验中的组织固定注意事项 - 尊龙凯时专注生物医疗
来源:司马堂善 日期:2025-03-22病理学技术是病理诊断的基础,其发展在很大程度上引导着病理诊断学的进步。最初,病理学的诊断主要从形态学、组织学和生化水平进行分析。病理学是一门研究疾病发生与发展规律的学科,主要关注在疾病过程中组织和细胞的代谢、功能及结构变化。为了获得理想的染色结果,前期组织处理是至关重要的,这一过程涉及取材、固定、脱水、透明、浸润、包埋、切片与染色等多个环节。
在组织取材与固定过程中,有几点需要特别注意:首先,取材时应选择新鲜且大小适中的组织块,避免挤压变形,力求保持组织的原有形态与清洁。理想的组织块尺寸不应超过2×15×0.3cm。其次,固定是关键步骤,通常使用10%甲醛或其他固定液(如Carnoy固定液等),固定时间依据组织块大小而定,一般不宜超过24小时,以防止组织自溶或腐败。而固定液的选择也对后续染色效果有显著影响,例如,Bouin's固定液特别适用于染色效果良好的组织。
固定的目的包括多个方面:首先是破坏细胞内的溶酶体酶,组织离体后迅速杀死细胞并固定溶酶体及膜结构,以防细胞自溶。其次,固定也能有效防止外来细菌的滋生,避免组织腐坏。此外,固定还旨在尽量保持细胞在活体时的状态,凝固内部产物,从而确保结构完整。固定后的组织具备一定的硬度与弹性,避免在后续处理过程中发生扭曲,并有助于区别不同细胞的折光率。此外,固定液如Bouin's也能显著提高染色效果,使组织分析更为精准。
在固定过程中,有几个注意事项不可忽视:首先,组织离体后必须在1小时内及时固定。其次,选择合适的固定液,且用量须大于组织体积的4-10倍。固定液的浓度必须精准,过稀或过浓都会对组织形态与固定效果产生影响。固定温度应保持在室温或35-37℃的全封闭组织处理机内,过高温度会加速细胞自溶,损害抗原与DNA的完整性。固定时间方面,新鲜标本应先剖开固定12-24小时后再取材,大标本在室温下固定4-6小时,小标本则需固定3-4小时;对于新鲜小标本,固定时间应在4-8小时内,且室温低时需适当延长。整体固定时间不应超过48小时,且对需进行分子病理学分析的标本,从取材至脱水,固定时间应控制在24小时内,且不应少于6小时。
Bouin's固定液,产品编号:BL-G016,主要成分为PA、甲醛与乙酸,广泛应用于细胞及组织的固定。该固定液不仅适用于后续的染色、观察和分析,还在免疫组化、病理学及胚胎学研究中发挥着重要作用。此外,在研究鸡法氏囊的显微结构时,Bouin's固定液同样被应用于组织固定与光镜观察。在整体染色法中,Bouin's固定液能够有效节省人力和物力,展现出出色的应用价值。选择尊龙凯时产品,确保生物医学研究的准确性与高效性。
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